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产品常见问题

为了提供更好的客户支持,解决客户关于流式抗体相关知识的疑问,我们整理并发布了关于流式抗体的最常见问题的解答(FAQs),并将持续更新。

流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。
免疫荧光抗体是经过免疫荧光实验验证的单克隆或者多克隆抗体,抗体通常情况下一般不带标记,通过FITC、Cyanine 3等荧光标记二抗显色,结果通过荧光显微镜观察。
流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。 免疫组化抗体是经过免疫组化实验验证的单克隆或者多克隆抗体,抗体通常情况下不带标记,通过酶标二抗催化底物显色,结果通过普通光学显微镜观察。
流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。 荧光标记抗体一般指的是带FITC、CY3等荧光标记的二抗,用于免疫荧光实验中识别对应的一抗,或者FITC、CY3标记的荧光一抗,可用于流式或免疫荧光实验,只有经过流式验证的荧光抗体才能称为流式抗体。
流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。 普通抗体一般指不带标记的单克隆或者多克隆抗体,反应性和应用一般较广,能做多个种属的多种实验应用,最后实验结果的观察需要依赖酶催化底物显色或者发出荧光后检测,或者FITC、CY3等荧光标记的二抗发出荧光检测。
流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。 封闭抗体是流式实验中用于特异性封闭细胞表面FC受体的,不带荧光标记的纯抗,如检测小鼠的细胞样本,封闭抗体为Purified Anti-Mouse CD16/32 Monoclonal Antibody。封闭抗体的作用是减少流式抗体染色过程中的非特异性染色,如果需检测的是某些表面表达FC受体较丰富的细胞,如巨噬细胞,染色前必须使用封闭抗体。
流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。 二抗一般不能直接识别到抗原,需要通过结合能识别目标蛋白的一抗间接偶联到目标蛋白上。针对不同的实验应用类型,二抗上面可以选择不同的标记,如做WB和IHC实验,通常情况下选择带HRP酶的二抗,做IF实验,一般选择带FITC、CY3等荧光基团的二抗,也有些二抗标记biotin, biotin自身并不带荧光集团,也不能催化底物显色或者发出荧光,因此选择biotin标记的二抗,还需要选择HRP酶或者荧光标记的链霉亲和素偶联到生物素上,进一步反应才能检测到目标蛋白。
一般建议所有流式实验中都使用同型对照抗体作为阴阳性细胞的判断依据,尤其是低表达或连续表达的指标,数据分析的时候不好圈门,同型对照抗体是必不可少的对照,但是对于一些分群明显的指标,如CD45、CD3、CD4、CD8等,可以不用做同型对照。
同型对照抗体用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面Fc受体等而产生的背景染色,能够作为阴阳性细胞的判断依据,尤其是低表达或连续表达的指标,数据分析的时候不好圈门,同型对照抗体是必不可少的对照。

同型对照是与染色的单克隆抗体: ①相同种属来源 ②相同免疫球蛋白及亚型 ③相同荧光素标记 ④相同剂量和浓度 ⑤由未免疫动物血清纯化而来 用此消除由于抗体非特异性结合到细胞表面Fc受体而产生的背景染色。 

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